HDN的診斷除應注意產婦的妊娠史，分娩史、輸血史及健在子女的血型和健康狀況外，無論對診斷與治療實驗室診斷都是非常重要的。

　　1．確診患嬰的依據(jù)

　　（1）紅細胞直接抗球蛋白試驗陽性：從患兒紅細胞上直接查到了被吸附的抗體，證明紅細胞已經受累。本試驗為直接證據(jù)。

　　（2）從紅細胞上釋放了具有血型特異性的抗體：①用熱釋放法檢查AB0血型不合嬰兒的紅細胞是否釋放了抗A，抗B，抗A、B抗體或AB0血型系統(tǒng)以外的抗體。②用乙醚釋放法檢查Rh血型不合的嬰兒紅細胞是否釋放了抗D、抗C或抗E抗體。本試驗也為直接證據(jù)。

　?。?）血清中存在與患嬰紅細胞上抗原相對應的游離抗體。

　　2．輔助診斷依據(jù)

　　（1）高膽紅素血癥：出生時臍血膽紅素超過85．8mol／L。（50mg／L），24h血清膽紅素超過102．6Fmol／L。（60mg／L），且以未結合膽紅素為主。

　　（2）孕母血清內查到與胎兒紅細胞不相合的完全抗體。

　　3．產前試驗如懷疑有HDN可能時，最好在產前開始檢查，以期及早診斷及采取適當?shù)念A防與治療措施。

　?。?）血清學檢查：首先要對孕婦做AB0血型系統(tǒng)及Rh系統(tǒng)的D抗原檢查及不規(guī)則抗體篩選，所有篩選出陽性抗體都要區(qū)別是IgG或IgM，并應進一步做抗體鑒定分析，以確定是否會引起HDN．因為抗體的存在并不一定都會發(fā)生HDN．

　　（2）羊水分析：有必要時，并且在有條件的情況下可以做子宮穿刺抽取羊水進行分析，檢查胎兒血型物質，確定胎兒血型。在450 nm處測定膽紅素含量的吸光度值，吸光度值越高表示官內溶血越嚴重。